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食品中蛋白质测定的注意事项
食品中蛋白质测定的注意事项
样品处理与消化阶段
样品量控制:固体样品称取0.2-2.0g,半固体2-5g,液体10-20ml(约含氮30-40mg),过量会导致消化不完全。
催化剂选择:优先使用硫酸铜(兼具催化与指示作用),避免使用氧化汞等污染性物质。
消化液配置:硫酸钾可提高沸点(但浓度过高易导致铵盐分解),浓硫酸需足量以确保有机物完全消解。
消化终点判断:溶液应呈清澈蓝绿色(若为褐色说明未完全消化)。
蒸馏与吸收阶段
碱化充分:加入过量氢氧化钠(400g/L)使溶液强碱性,确保氨气完全释放。
装置气密性:检查凯氏定氮仪密封性,防止氨气泄露影响结果。
吸收液选择:常用20g/L硼酸溶液吸收氨气,弱酸性环境利于后续滴定。
滴定与计算阶段
指示剂使用:混合甲基红与溴甲酚绿(比例1:2)可增强颜色变化灵敏度。
滴定速度:缓慢滴加盐酸标准液,避免颜色突变导致终点误判。
换算系数:根据样品类型选择(如肉类6.25、小麦5.70、大豆5.17)。
其他注意事项
实验条件控制:环境温度、湿度需稳定,避免干扰反应进程。
试剂纯度:硫酸、氢氧化钠等需高纯度,避免杂质影响滴定结果。