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沙门氏菌生化鉴定需通过三步递进式反应确认,具体步骤如下:
一、核心鉴定步骤
1、初步筛选
三糖铁琼脂试验:接种后观察反应,典型沙门氏菌表现为斜面红色(K)、底层黄色(A)并产气,多数菌株底层变黑(硫化氢阳性)12。
赖氨酸脱羧酶试验:沙门氏菌通常为阳性(紫色),需同步接种对照培养基2。
2、进一步确认
结合以下试验结果:
靛基质试验(阴性)
尿素酶试验(阴性)
氰化钾试验(不生长)
补充试验(必要时)
根据前两步结果选择补充试验,如:
甘露醇发酵
ONPG试验等
二、操作关键点
纯菌落接种:挑取可疑菌落中心,避免污染,接种后需划线至 营养琼脂平板 验证纯度。
三、培养基注意事项:
三糖铁琼脂需透气培养,避免密闭导致假阴性
赖氨酸脱羧酶试验需同步设置对照管。