金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）是常见的食源性致病菌，其产生的肠毒素可导致食物中毒。

一、检测标准依据

国际标准：ISO 6888-1:2021（平板计数法）、FDA BAM（《细菌学分析手册》）第12章

中国国家标准：GB 4789.10-2016《食品安全国家标准食品微生物学检验金黄色葡萄球菌检验》

二、检测流程（以GB 4789.10-2016为例）

1. 样品处理

无菌取样：25g/mL样品 + 225mL无菌生理盐水或缓冲蛋白胨水（BPW），均质后制成1:10稀释液。

2. 增菌培养（选择性富集）

7.5%氯化钠肉汤：36℃±1℃培养18-24小时，促进金黄色葡萄球菌生长（抑制部分杂菌）。

3. 分离培养

接种至选择性培养基：Baird-Parker琼脂平板（含亚碲酸钾和卵黄）在36℃±1℃条件下培养24-48小时。

典型菌落：黑色凸起、边缘光滑，周围有透明圈（卵磷脂酶活性）和浑浊环（脂肪酶活性）。

血琼脂平板（辅助鉴定）：观察溶血环（β-溶血）。

4. 确证试验

革兰染色镜检：阳性球菌，呈葡萄串状排列。

生化鉴定：

凝固酶试验（试管法/玻片法）：阳性（血浆凝固）。

过氧化氢酶试验：阳性。

其他：甘露醇发酵、耐热核酸酶试验等。

分子生物学方法：PCR检测nuc基因（编码耐热核酸酶）或coa基因（凝固酶）。

5. 肠毒素检测（如需要）

采用ELISA、免疫层析法或质谱法检测肠毒素（SEA-SEE等）。

三、快速检测方法

显色培养基（如CHROMagar™）：菌落呈特定颜色（如粉红色）。

免疫学方法：乳胶凝集试剂盒检测凝固酶或肠毒素。

实时荧光PCR：直接检测样品中的金黄色葡萄球菌特异性基因。

自动化仪器：如VITEK®、MALDI-TOF MS（质谱快速鉴定）。

四、结果报告

定量报告（平板计数法）：CFU/g（mL）。

定性报告：检出/未检出。

五、注意事项

避免假阳性：凝固酶试验需结合其他生化结果（如某些凝固酶阴性葡萄球菌可能干扰）。

样品代表性：高风险食品（如乳制品、熟肉、糕点）需重点监控。

生物安全：实验操作应在生物安全二级（BSL-2）实验室进行。

六、常见适用食品

乳及乳制品、肉制品、即食食品、调味品、冷冻饮品等。