‌1、‌无菌操作要求‌：

1）接种细菌时必须穿工作服、戴工作帽。

2）进行接种食品样品时，必须穿专用的工作服、帽及拖鞋，并在无菌室缓冲间进行，工作前经紫外线消毒。

3）接种食品样品时，应在进无菌室前用肥皂洗手，然后用75%酒精棉球将手擦干净。

4）进行接种所用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌，金属用具应高压灭菌或用95%酒精点燃烧灼三次后使用。

5）接种样品、转种细菌必须在酒精灯前操作，吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。

6）接种环和针在接种细菌前应经火焰烧灼，必要时还要烧到环和针与杆的连接处。

2、‌无菌间使用要求‌：

1）无菌间通向外面的窗户应为双层玻璃，并要密封，不得随意打开，并设有与无菌间大小相应的缓冲间及推拉门。

2)无菌间内应保持清洁，工作后应消毒，擦拭工作台面，不得存放与实验无关的物品。

3）无菌间使用前后应将门关紧，打开紫外灯进行消毒，照射时间不少于30分钟。

4）处理和接种食品标本时，进入无菌间操作，不得随意出入，如需要传递物品，可通过小窗传递。

3、‌消毒灭菌要求‌：

1）微生物检测用的玻璃器皿、金属用具及培养基、被污染和接种的培养物等，必须经灭菌后方能使用。

2）灭菌方法包括干热和湿热高压蒸气锅灭菌，温度和时间根据具体要求进行调节。对于某些易受高压蒸气破坏的物质，可以采用间歇灭菌方法。

4、‌无菌室的使用与管理‌：

1）无菌室应保持清洁整齐，仅存放必要的检验用具，如酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环等。

2）每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作台、门、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液喷雾消毒空气，最后紫外灯杀菌半小时。

3）定期检查室内空气无菌状况。